RT112人膀胱癌細胞
種屬來源: | 人 |
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組織來源: | 膀胱 |
疾病特征: | 膀胱癌 |
細胞形態: | 上皮細胞樣 |
生長特性: | 貼壁生長 |
培養基: | RPMI-1640,90%;FBS,10%。 |
生長條件: | 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%; 溫度:37 ℃, |
傳代方法: | 1:2至1:6,每周2次。 |
凍存條件: | 90% *培養基+10% DMSO,液氮儲存 |
支原體檢測: | 陰性 |
RT112人膀胱癌細胞
貼壁細胞接收后的操作流程與注意事項
1.收到細胞當天盡快更換新鮮*培養基,第二天再進行消化處理
2.如果細胞收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態,請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的*培養基到新的培養皿/瓶繼續培養觀察。同時原培養瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的*培養基,培養觀察
3.若出現生長不均:貼壁細胞若出現分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養基進行培養
貼壁細胞常規培養傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)
1.吸出原培養瓶中的培養基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加適量0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間)
2.鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6~8ml *培養基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散
3.取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中,添加適當的*培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養
4.注意培養基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項作或者凍存